栏目导航

avigation

网站首页>技术文章 > 简述实时定量pcr仪采购要领!
简述实时定量pcr仪采购要领!
  目前购买实时定量pcr仪系统,一般包括:
  实时定量pcr仪 +实时定量pcr仪 开机检测试剂+通用电脑+自动分析软件
  实时定量pcr仪 组成:温控模块、光学系统(光源、检测器、光路传导)
  采购要领
  1、温控模块/Peltier:
  普通的Peltier加热方式具有明显边缘效应,均一性差,是上一代的模块PCR加热技术,正处于被淘汰的边缘。
  目前较好的温控模块:银,在金属中银的导热性能较高,升降温速度快,孔间温度均一性好,边缘效应相应减少
  金属的热传导系数表:
  银 429 >铜 401 > 金 317 >铝 237  >铁 80 >锡 67  > 铅 34.8
  另:
  单一模块升降温速度高并不代表样本升降温速度也高,因此在温控模块升降温速度对比中,最终是要看样本的升降温速度是否快
  最大升降温速度不等与平均升降温速度
  2、光源:
  光强比较:髙强度白光LED > 卤钨灯 >单色LED
  白光LED的亮度约是卤钨灯的3倍左右,单色LED的10倍左右,能够捕捉到更多的荧光信号,是专业光源领域的新技术代表,2011年开始普遍应用于专业仪器,无论光强、灵敏度与均一性可与上一代氙灯光源媲美,且寿命提升了10倍以上。
  钨灯灯丝本身存在闪烁不稳定的问题,其激发能量远低于白光LED,事实上,无需好的品牌汽车的旗舰概念车,如丰田雷克萨斯,已经开始使用白光LED作为车头灯。
  寿命比较:髙强度白光LED = 单色LED  >卤钨灯
  白光LED的寿命长达10000小时以上,一般可以使用5-10年左右,基本上超过了一般科研仪器的正常工作寿命,基本终身无需更换光源,而卤钨灯光源基本每2年就要更换一次,费时费力,南方更是不足一年就要更换一次
  另:
  卤钨灯每次运行需要半小时预热,其中累计散发的热量对荧光具有明显的淬灭作用。
  3、检测器:
  实时定量pcr仪灵敏度:冷CCD >CCD >光电倍增管 CPM  >光电二极管
  CCD作为荧光信号的接受器,其质量直接决定了仪器的检测灵敏度和稳定性。
  10℃的冷CCD,和常温CCD有着质的区别,在专业光学领域,冷CCD的造价成本至少要比常规CCD高出一倍以上。冷CCD在更低的温度下进行光信号捕捉,能够提供更高的光感灵敏度和更低背景噪音。因此,有的荧光定量PCR能够稳定区分1000和2000拷贝的浓度差异,而有的只能做到区分5000和10000个拷贝数。
  4、光路传导::
  光路的传导 光路设计应尽可能有效消除边缘效应,光路设计是否有效消除边缘效应,只有实验才能检验
  实时定量pcr仪检验方法:96/384孔板中及四角各布置标准品,看差异
  其中
  a 光源直接照射微孔板上:边缘效应明显
  b 逐孔移动式采光:无边缘效应,但需时常校正
  c 散射采光:边缘效应较明显,切换光源时需要光源组件移动
QQ在线客服
电话咨询
  • 13661502114