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流式荧光技术的优胜之处在哪里?
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发布时间:2022-02-14
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流式荧光技术,是基于编码微球和流式技术的一种临床应用型高通量发光检测技术,又称悬浮阵列、液态芯片、液芯以及xMAP技术等。该技术有机整合了荧光编码微球、激光检测、应用流体学、高速数字信号处理技术等多项技术,具有多指标联合检测、通量高、速度快、标本用量少、既能检测蛋白也能检测核酸、既适用于临床检验也适用于科研等多种优点,流式荧光技术是通过美国FDA认证的临床应用型高通量诊断技术。
流式荧光技术法的标准曲线由5-PL(five-parameterlogistic)方式进行拟合,这种拟合方式使得能够被准确定量的浓度范围(动态范dynamicrange)更宽,尤其适用于夹心法及多指标免疫测定时。检测线性范围也达到3~4个数量级,远高于CLIA和TRFIA(后二者为2~3个数量级);在较低检测限达到pg级,流式荧光技术检测灵敏度是ELISA的100倍以上,线性范围可达ELISA的10倍以上。样本用量少。
当联合检测高于2项指标时,检测90人份样本,其检测速度与化学发光方法相当,仅需1.5小时,血清标本仅需l0~20微升。在标本用量上流式荧光技术的优势更是显而易见的,这对于某些标本难于获得的情况尤为适用。同时也降低了所需试剂、耗材、人工成本等费用,减轻了患者的经济负担。重复性好。流式荧光技术试剂检测肿瘤标志物的精密度考察结果表明,通常批内CV<5%,批间CV<10%,说明试剂具有较好的重复性。
流式荧光技术的重复性好于ELISA,原因有三:
(1)没有ELISA中样品需高倍数稀释而造成测定误差;
(2)直接的荧光检测系统而非ELISA依赖酶放大作用的间接检测;
(3)每种微球读取50~100个,最终取荧光值的中值作为结果,相当于每个样本重复检测了50~100次,而ELISA仅为双复孔或者三复孔。
利用流式荧光技术这一新型高通量分子检测技术,联合检测多项肿瘤标志物,用于临床上对多种肿瘤的辅助诊断、疗效和预后评价,以及对无症状人群和高危人群的普查,为快速、准确、高通量检测肿瘤标志物及肿瘤的诊断、治疗提供一种崭新的技术手段。