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糖化白蛋白检测(过氧化物酶法)的检验原理
糖类的营养价值主要是供给能量,此外糖也是人体的重要组成成分之一。正常人体内糖代谢的中心问题之一是维持血糖浓度的相对恒定。临床上重要的糖代谢紊乱也主要是血糖浓度过高(高血糖症)和过低(低血糖症)。
 
糖化蛋白是指血液中已糖通过非酶促作用,将糖基加到蛋白质的氨基酸基团上形成的不可逆糖蛋白结合物,一般分为糖化血红蛋白(HbA1c)以及糖化白蛋白(GA)。
 
关于糖化白蛋白检测(过氧化物酶法):
 
(1)预期用途(Intended Use)
 
用于体外定量测定人血清中糖化白蛋白(GA)和白蛋白(ALB),得出的糖化白蛋白浓度除以白蛋白浓度算出糖化白蛋白的比值(%)。本试剂仅应用于体外诊断试验。
 
(2)检验原理
 
1、GA的测定
 
在样本(血清或血浆)中,首先加入对白蛋白有特异性的蛋白酶,分解糖化白蛋白,生成糖化氨基酸;然后糖化氨基酸在特异性果糖基氨基酸氧化酶(FAOD-E)的作用下变成葡萄糖醛酮、氨基酸和过氧化氢;在过氧化物酶的作用下,过氧化氢与4-氨基安替比啉和2-羟基-3-间甲苯胺丙磺酸钠发生Trinder反应,生成红色醌亚胺,测定其吸光度变化,得到样本中糖化白蛋白的浓度。
 
2、ALB的测定利用白蛋白可与某些阴离子染料结合,而球蛋白基本不结合这些染料的特性,血清白蛋白(ALB)的检测可根据使用试剂的不同分为BCG法(bromcresol green,溴甲酚绿)和BCP法(bromcresol purple,溴甲酚紫)。因BCG法灵敏度高、重复性好,目前国内ALB的检测以BCG法最为常用,但BCG对血清白蛋白特异性稍差,BCP法测定白蛋白能有效增强低蛋白血症患者中测定结果的可信度,可以避免抗坏血酸及高热量氨基酸输液对检测结果的影响[5]。
 
3、糖化白蛋白值(%)的计算
 
利用得出的GA浓度除以ALB浓度,计算出样本的糖化白蛋白(%)。
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